尼氏染色實驗技術:
Franna Nissl (1860-1919) 1892年創立了Nissl染色法,以發現Nissl小體和Nissl變性而聞名。常用的堿性染料有Cresyl violet (焦油紫,甲酚紫,克紫) ;thionine (硫堇) ;tolridine blue (甲苯胺藍)等。
尼氏體為嗜堿性物質,又稱嗜染質,光鏡下呈斑塊狀或細粒狀散在均勻分布。 在一些大型的運動神經元 ,尼氏體大而多,宛如虎皮花紋,又稱“虎斑”。電鏡下,尼氏體由大量平行排列的粗面內質網和其間的游離核糖體組成。尼氏體是神經元胞體細胞質的特征性結構之一,神經元胞質另外 一特征性結構為神經原纖維。
尼氏染色實驗技術原理:
正常的神經細胞都含有一定數量的尼氏體,它們主要分布于神經細胞的漿中,形狀有大有小,如三角形,有的為橢圓形。這些物質能被大部分的藍色染料所染色,這些染料如焦油堅牢紫( CresyI fast violet )、亞甲藍( methylene blue )、甲苯胺藍( toluidine blue )、硫堇( thionin )等鈄其染為藍色。但是,當神經細胞受傷后,胞質內的尼氏體更可發生變化,嚴重的可消失。
實驗操作流程:
1、切片脫蠟至水;
2、用焦油堅牢柴水溶液浸染20-30分鐘
3、水洗;
4、用95%酒精分化;
5、*脫水,二甲苯適明,中性樹膠。